Alejandra Vega



PRODUCCIÓN DE PROTEÍNA CELULAR EN CASA POR MEDIO DE LEVADURA 

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Desde la antiguedad, las levaduras se han reconocido como protagonistas en la producción de alimentos y bebidas mediante la fermenación. Actualmente, son utilizadas en diferentes áreas de la biotenología. Al igual que todos los microorganismos, las levaduras tienen carcterísticas específicas de acuerdo a la temperatura y las condiciones a las que son cultivadas.  
Teniendo en cuenta lo anterior planteado, para generar una produccion exitosa de proteina celularm es indispensable proporcionar las concidiones precisás a la levadura, para que asi se adapte y desarrolle adecuadamente y lograr otener la producción esperada

Por ello, a continuacion, demostrare graficamente todo el proceso que se llevo a cabo para la obtencion de esta proteina celular, plasmando calculos, cantidades y tiempos necesarios de forma sencilla y practica en casa. 


INICIEMOS NUESTRA PRACTIVA !! 
  • PASO 1.  

Define las concentraciones  y volumenes a utilizar. 

Volumen total : 220 ml
Volumen de trabajo: 220 ml * 90% = 200 ml 土𑴉
Volumen del inoculo (En solido): 200 ml * 1% = 2 gr

" Dato: Usamos el 90 % en el volumen de trabajo porque es la medida adecuada a en un reactor, igual que el 1% es la proporcion adecuada para el incoculo" 



  • PASO 2
Calculemos el volumen de cada fuente que usaremos para crear nuestro medio. En el caso del carbono, podemos usar sacarosa como fuente de carbono ya que es muy comun encontrarla en nuestra casa como "azucar".   


Foto tomada: Alejandra Vega
Formularemos de la siguiente forma: 
   
   
                            C1 * V1  =   C2  * V2 
100%  [ ] Sacarosa * V1  =  10% [ ] Carbono *  200ml 
                                    V1  =  10% [ ] Carbono *  200ml
                                                   100%  [ ] Sacarosa   
                                   V1  =  20 gr Sacarosa (Agregar)   




En el caso de la fuente de nitrogeno, usaremos gelatina sin sabor pues esta contiene peptona que nos proporciona el nitrogeno y sin sabor para evitar tonalidades en nuestro proceso y asi evidenciar los cambios. 

Si de carbono tomamos el 10% y de nitrogeno tomaremos el 3%, usaremos los 20 gr de sacarosa obtenidos anteriormente y haremos los calculos teniendo en cuenta la cantidad de nitrogeno contenido en la gelatina a trabajar

Foto tomada: Alejandra Vega 


20 gr Sacarosa  * 3%  = 0.6 gr  

0.6 gr  --- >  14% [ ] Nitrogeno en gelatina 
X  < ----   100% [ ] Total esperada 
  
X  = 4,28 gr de gelatina (Agregar) 



Por ultimo, calculamos la fuente de fosforo, que en este caso en casa tenia avena en polvo, la cual tiene un 6% de fosforo, pero si en casa tienes a huevo, mantequilla.. etc. 


Foto tomada: Alejandra Vega 



20 gr Sacarosa  * 3%  = 0.6 gr  

0.6 gr -- > 6% [ ] Fosforo en avena
X < ----  100% [ ] Total esperada 


X = 10 gr de avena (Agregar) 


PASO 3. 


Iniciamos la seccion metodologíca con un paso a paso para crear nuetro medio. 



                              
                              Foto tomada: Alejandra Vega.
                         Procedimiento de estelizicacion por calor  

Para iniciar toda práctica es necesario tener los utensilios y manos limpias, también las zonas de trabajo e implementos que estarán en contacto con el material a trabajar; Luego de cumplir este paso, puedes proseguir con la metodologia. 

Foto tomada: Alejandra Vega
Pesar cada ingrediente segun calculos anteriores

Teniendo en cuenta los calculos anteriores, pesa cada ingrediente y separalo en un recipiente o en cajitas de papel aluminio para evitar la perdida del material, luego de tener cada uno de estos por aparte, y el recipiente esterilizado bien seco.... 


Foto tomada: Alejandra Vega 
Agregar cada ingrediente

Inicia depositando el volumen de sacarosa al recipiente, seguido de los gramos la fuente de nitrogeno escogida, en este caso la gelatina sin sabor, continúa con el volumen de avena en polvo y finaliza agregando los gramos de nuestro inoculo (levadura activada seca). 

Luego de agregados todos los ingredientes al recipiente, llena el total del volumen a trabajar planteado anteriormente con agua y sella el recipiete para evitar que se contamine con animales o contaminacion externa. 

Deja tu recipiente o reactor en un sitio donde no tenga contacto con luz directa, donde la temperatura no sea muy alta ni muy baja y encargate de estar agitandolo constantemente, minimo una vez al dia y listo. Anota cada cambio o aspecto diferente que veas al pasar los dias y reportalo....

Fotos tomadas: Alejandra Vega
Evolucion de la mezcla al pasar los dias  


  
Tabla con las caracteristicas observadas durante los dias evalados 


Luego de pasar los ocho dias de observacion y produccion de biomasa, teniendo en cuenta  las respectivas anotaciones y cada uno de las caracterisiticas evidenciadas, puedes proseguir con la metodología, la cual tiene como finalidad obtener el peso seco de una muestra de la produccion anterior y asi finalizar la practica en casa de produccion de proteina celular 


Foto tomada: Alejandra Vega
Filtracion de la muestra

Con ayuda de un embudo y una servilleta en forma de cono, deposita un volumen de muestra previamente agitada, en este caso se usaron 30 ml aproximadamente...

Foto tomada: Alejandra Vega
Deja secar la muestra 

Luego de filtrar todo el liquido posible con la servilleta, dejalo a la interperie para que el liquido y la humedad resultante se evapore... 

Foto tomada: Alejandra Vega
Peso en seco de la biomasa obtenida 

Luego de tener bien seca la muestra, con ayuda de una gramera o un peso, pesa la muestra y pesa una servilleta sola, para asi poder realizar el calculo exacto, teniendo en cuenta el valor total, menos el peso obtenido con la servilleta sola. 

Como conclusion de nuestro proceso de produccion de proteina celular, podemos destacar muchos parametros. El hecho de que es una practica que se facilite su desarrollo en casa, nos permitio concluir con nuestros conocimientos planteados al inicio del curso de microbiologia industrial, tambien es de suma importancia, evaluar esto a nivel industrial segun sea nuestro fin en el proceso, tenemos que adaptar el microorganismos a sus condiciones optimas para que este se desarrolle de forma adecuada y tenga un buen nivel de produccion, dar los nutrientes y componentes necesarios para su adapatacion son puntos primordiales, como tambien tener una evaluacion constante y de rigurosa observacion.

Tenemos que aprovechar las diferentes adversidades que se nos presentan en nuestro camino tanto profesional, como personal, en este momento el mundo atravieza una situacion que nadie esperaba, el hecho de enfrentarnos a una pandemia, es algo que nos sorprendio y nos sigue sorprendiendo, por ello, yo como estudiante de microbiologia industrial, seguí mí camino y experimente el desarrollo de ciertas practicas en casa, me adapate a diferentes ambientes, y solucione problemas en cuando a la falta de materiales o implementos necesarios para las mismas. Nosotros como estudiantes jamas dejamos de aprender y  esto tambien nos ayuda a valorar un poco las cosas. No es bueno estancarnos ni ver solo los problemas, de cada situacion se aprende y confiando en que la situacion mundial mejore, seguiremos aprovechandolo. 



"Nunca dejes de investigar y experimentar"

Maria Alejandra Vega 
Estudiante de microbiologia Industrial. 
Universidad de Santander. UDES.
Alejandrav.0297@hotmail.com 


Bibliografia: 
Mejía-Barajas, Jorge A, Montoya-Pérez, Rocío, Cortés-Rojo, Christian, & Saavedra-Molina, Alfredo. (2016). Levaduras Termotolerantes: Aplicaciones Industriales, Estrés Oxidativo y Respuesta Antioxidante. Información tecnológica27(4), 03-16. https://dx.doi.org/10.4067/S0718-07642016000400002 





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